中國科學(xué)院廣州生物醫藥與健康研究院的實(shí)驗室里小鼠獨立透氣籠里的小白鼠?！　?/p>

　　實(shí)驗人員將小鼠取出透氣籠。

　　南方醫院、省人民醫院、中山大學(xué)附屬腫瘤醫院等廣東省內的多家醫院，正在開(kāi)展實(shí)體瘤、白血病等疾病的臨床前研究。被科研人員研究的“病人”有點(diǎn)特殊，是一群經(jīng)過(guò)特別培養的小鼠。這些小鼠幾乎沒(méi)有免疫能力，而且要在體內“重現”肺癌細胞以及免疫細胞。這些幫人類(lèi)試藥的小鼠，來(lái)自中國科學(xué)院廣州生物醫藥與健康研究院，是國內唯一具有自主知識產(chǎn)權的第三代免疫缺陷小鼠。

　　國外第三代小鼠“當時(shí)不對中國出售”

　　科研界曾將小鼠體內的某些基因特異性敲掉，導致其T淋巴細胞缺失。這種小鼠，免疫功能很弱，就是很容易得病?；A醫學(xué)研究人員，嘗試讓這種小白鼠得上人類(lèi)會(huì )得的病，再在這種小鼠上測試不同的治療方法。

　　隨后，科學(xué)家又在B淋巴細胞上“做手腳”，小鼠免疫功能更差了，改進(jìn)后B、T細胞都缺陷的小鼠模型，被稱(chēng)為第二代免疫缺陷小鼠。雖然B、T細胞都不起作用了，但還有一類(lèi)N K細胞可以發(fā)揮免疫功能，因此這種小鼠還不是最理想的免疫缺陷小鼠。

　　在本世紀初，日本和美國培養出了三類(lèi)免疫細胞都缺失的小鼠。彼時(shí)，李鵬從英國劍橋大學(xué)回國后，進(jìn)入中國科學(xué)院廣州生物醫藥與健康研究院華南干細胞與再生醫學(xué)研究所。當時(shí)，他試圖購買(mǎi)國外的第三代免疫缺陷小鼠做實(shí)驗。但悲劇的是，多番努力后，都未能如愿。因為國外的這些小鼠都不對中國出售。這意味著(zhù)，想要用國外的第三代小鼠進(jìn)行研發(fā)、轉化根本不可能。李鵬試圖打破“壁壘”，培養出自己的第三代免疫缺陷小鼠NSI品系。

　　鎖定基因進(jìn)行敲除 第三代小鼠在廣州誕生

　　要徹底去除NK細胞，首先需要找到對NK細胞發(fā)育起關(guān)鍵調節作用的基因，隨后利用基因編輯技術(shù)，“對目的DNA片段敲除或加入，造成目的基因功能缺失?！?010年，TALEN基因敲除技術(shù)興起，這給李鵬研究團隊帶來(lái)了基因敲除的契機。多番嘗試后，團隊鎖定了“IL2rg”這個(gè)基因，“這個(gè)基因對B、T和NK細胞的發(fā)育有關(guān)鍵作用，敲掉后，N K細胞就發(fā)育不下去了?！痹搱F隊肖毅仁博士說(shuō)。

　　隨后，團隊直接在第二代小鼠體內，敲掉了這個(gè)基因，使得這三種淋巴細胞發(fā)育被阻斷了?！鞍亚贸d體注射到受精卵里，由于這個(gè)載體隨身帶了個(gè)‘剪刀’，可以特意性地剪斷目的基因，結果是基因組在修復過(guò)程中，通過(guò)外加的錯誤模版把一些錯誤信息導入到了目的基因的地方，使得目的基因無(wú)法恢復成原來(lái)正常狀態(tài)，無(wú)法正常工作，最終達到敲除目的基因的目的?！眲?dòng)物管理人員解釋。

　　接下來(lái)，被“修飾”后的受精卵被移植到小鼠體內。懷胎近21天后，經(jīng)過(guò)連續三代的培育，第三代免疫缺陷純合子小鼠正式誕生。這類(lèi)小鼠幾乎沒(méi)有免疫能力。據介紹，這是國內唯一具有自主知識產(chǎn)權的第三代免疫缺陷小鼠。

　　移植成功率提高30%小鼠體內長(cháng)出膀胱瘤

　　肖毅仁介紹，通過(guò)檢驗，第二代免疫缺陷小鼠移植病人原代腫瘤成功率在30%到40%之間，而第三代可以能達到60%到70%?！八^移植成功率更高，指的是病人的組織或細胞在第三代小鼠里成長(cháng)更容易?！倍?，越來(lái)越多的科研報道證明，病人的腫瘤能否在第三代免疫缺陷小鼠中成瘤，還可以用來(lái)預測腫瘤的惡性程度。

　　廣州生物院和廣州中醫藥大學(xué)的合作確實(shí)顯示，以往在第二代小鼠里無(wú)法生長(cháng)的膀胱癌，現在在第三代小鼠里卻長(cháng)出來(lái)了。李鵬也說(shuō)，以往的小鼠模型，均一性都不夠好，“把腫瘤植入，殘留的免疫系統會(huì )排斥掉部分腫瘤細胞，有的小鼠腫瘤長(cháng)得大，有的長(cháng)得小。而第三代小鼠幾乎沒(méi)有免疫系統，腫瘤長(cháng)得都差不多大，那就可以隨機分配，一組給藥，一組不給藥，更好地評估藥物的效果?！?/p>

　　第三代免疫缺陷小鼠，也可助力現今最流行的“精準醫療”。試想下，一個(gè)癌癥患者，興許可以把自己的疾病，甚至加上免疫系統，都往小鼠身上“搬”，然后通過(guò)小鼠來(lái)篩選，我們就可以知道什么藥物組合最適合自己。每個(gè)癌癥患者都有個(gè)體差異，用小鼠來(lái)精準“試錯”，這可能都不是夢(mèng)?！爱斎?，目前國內對這個(gè)領(lǐng)域的政策還很模糊?！毙ひ闳收f(shuō)。

　　揭秘

　　成本：千余只小鼠去年花了上百萬(wàn)

　　據南都記者了解，“免疫缺陷小鼠”的研究團隊共有十幾個(gè)人，這一團隊從2011年開(kāi)始研究，到2013年才成功培育出第一只基因缺陷小鼠。在廣州生物院的動(dòng)物房，住著(zhù)千余只小白鼠，它們三三五五地結伴，呆在同一個(gè)籠子里?；虬察o，或活潑。因為飼料在頭頂，不能跟排泄物混合，餓了的小老鼠，會(huì )一直蹦跳著(zhù)朝上覓食。同伴多是一母同胎，不然容易打架。而且，住一起的要么都是“兄弟”，要么都是“姐妹”，“8周后它們性成熟了會(huì )交配，所以會(huì )把它們隔離開(kāi)?！眲?dòng)物房管理人員說(shuō)。

　　這些小鼠養了后怎么使用？既可以跟醫院合作進(jìn)行研究，分享研究成果。同時(shí)，也能針對不同研究需求提供“定制式”技術(shù)服務(wù)?！拔覀內傻剿某傻慕?jīng)費都花在飼養上。去年養殖千余只小鼠的經(jīng)費有100萬(wàn)元左右。而一個(gè)醫療項目，如果做得有說(shuō)服力，至少要100、200只小鼠吧?！崩铢i說(shuō)。

　　環(huán)境：房間“無(wú)特定病原體”實(shí)驗員發(fā)燒禁止入內

　　小白鼠的生活環(huán)境可不簡(jiǎn)單，它們住在“無(wú)特定病原體”的房間里，溫度保持在20到24攝氏度，濕度40%到70%。住的獨立送風(fēng)隔離籠子，流入的空氣要經(jīng)過(guò)過(guò)濾，呼出的廢氣也要通過(guò)其他管道排出。不管誰(shuí)進(jìn)房間，都要換上防護服，戴口罩、手套，只把眼睛露在外面，還要通過(guò)空氣淋浴消毒。就連小鼠吃的食物，也要經(jīng)過(guò)高壓滅菌?！皩?shí)驗員感冒發(fā)燒了的話(huà)，會(huì )被禁止進(jìn)入?！崩铢i說(shuō)，之所以這么嚴格，是因為小鼠在免疫能力上有缺陷，一不小心，可能就生病了，而這種獨特的保護環(huán)境，能讓小鼠更舒適。

　　有的小白鼠喜歡玩水。小鼠住的籠子，本來(lái)是一周要更換一次。但是有的小鼠愛(ài)玩水，一兩天，水籠就會(huì )被它玩淹了，實(shí)驗員得時(shí)刻觀(guān)察，臟了就要盡快更換籠子。有的小鼠在換籠時(shí)，還會(huì )和飼養員玩起捉迷藏，躲避鑷子的“捕捉”，一會(huì )在籠子里狂奔，一會(huì )又跳到籠邊，不亦樂(lè )乎。小白鼠也有脾氣。有時(shí)，小鼠并不太安分，跳來(lái)跳去，煩躁不安時(shí)，實(shí)驗員還得拿玩具哄它逗它。小白鼠有時(shí)還厭食。這時(shí)，實(shí)驗員會(huì )拿點(diǎn)特別的零食，比如雞蛋、瓜子，當然，是消毒后的，喂給小鼠吃。

　　工作：實(shí)驗員兼職外科醫生向小鼠移植癌細胞

　　實(shí)驗室的小白鼠最重要的使命則是獻身科學(xué)，為人類(lèi)試錯。從醫院獲取腫瘤組織后，為了讓小鼠也患癌，實(shí)驗員有時(shí)還得充當“外科醫生”，為它做外科手術(shù)。

　　通常，小鼠麻醉后，實(shí)驗員會(huì )局部剪開(kāi)小鼠皮膚和腹膜，在目的器官的外膜剪個(gè)小口，將腫瘤組織通過(guò)移植軟管移植到目的器官，再用激光筆閉合傷口，止血，縫合皮膚和腹膜，最后等到小鼠在37℃恒溫臺上蘇醒后，再放入飼養籠里。在這之后，實(shí)驗員通過(guò)觸摸，使用游標卡尺測量，判斷腫瘤有否長(cháng)大?！爱斎?，腫瘤長(cháng)到1.5立方厘米后，會(huì )通過(guò)手術(shù)，將腫瘤組織取出進(jìn)行檢測?！?/p>

　　出品：南方都市報科學(xué)新聞工作室

　　主持：陳養凱

　　采寫(xiě)：南都記者 陽(yáng)廣霞 通訊員 黃博純

　　攝影：南都記者 譚慶駒

原載于《南方都市報》2017年1月6日科學(xué)版 鏈接