根據“廣東省科學(xué)技術(shù)廳關(guān)于2015年度廣東省科學(xué)技術(shù)獎推薦工作的通知”的要求，現將生物院擬申報項目《豬基因突變技術(shù)創(chuàng )新及基因修飾豬模型的建立》的主要完成單位、主要完成人、項目簡(jiǎn)介、代表性論文目錄予以公示。若對完成單位、完成人及項目有異議，可在2015年6月29日-7月5日以書(shū)面形式送交科研教育處。異議應當簽署真實(shí)姓名或加蓋單位公章，并注明聯(lián)系方式，否則不予受理。  

　　聯(lián)系人：潘光錦　 黃洲萍  

　　聯(lián)系電話(huà)：020-32015213　 020-32093465  

　　傳真：020-32015229  

　　地址：廣州市科學(xué)城開(kāi)源大道190號  

　　附件：項目名稱(chēng)、主要完成單位、主要完成人、項目簡(jiǎn)介及代表性論文目錄 

　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　中國科學(xué)院廣州生物醫藥與健康研究院  

　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　二○一五年六月二十九日  

　　附件：項目名稱(chēng)、主要完成單位、主要完成人、項目簡(jiǎn)介及代表性論文目錄 

　　項目名稱(chēng)：豬基因突變技術(shù)創(chuàng )新及基因修飾豬模型的建立 

　　主要完成單位：中國科學(xué)院廣州生物醫藥與健康研究院，南方醫科大學(xué)，浙江大學(xué)，深圳華大基因研究院 

　　主要完成人： 

　　賴(lài)良學(xué)，第一完成人，職稱(chēng)：研究員，工作單位：中國科學(xué)院廣州生物醫藥與健康研究院，完成單位：中國科學(xué)院廣州生物醫藥與健康研究院，主要貢獻：團隊負責人，負責項目方向的整體規劃和設計。是5項科學(xué)發(fā)現的主要完成人，是5篇代表性論文的通訊作者，是其中4名學(xué)生的博士指導教師。在本項目中，通過(guò)將iPS、鋅指核酸酶（ZFN）介導的基因打靶技術(shù)、2A序列介導的多基因協(xié)同表達技術(shù)應用于豬的基因組修飾，解決了大動(dòng)物基因打靶效率低以及多基因協(xié)同表達的技術(shù)瓶頸，并獲得了亨廷頓舞蹈癥模型豬和OG2模型。 

　　樊娜娜，第二完成人，職稱(chēng)：副研究員，工作單位：中國科學(xué)院廣州生物醫藥與健康研究院，完成單位：中國科學(xué)院廣州生物醫藥與健康研究院，主要貢獻：主要負責本項目的具體實(shí)施，在第一項科學(xué)發(fā)現中通過(guò)將iPS隨機分化，待外源基因表達沉默后再進(jìn)行核移植，成功獲得了iPS來(lái)源克隆豬，證明豬iPS可以通過(guò)核移植技術(shù)獲得克隆豬后代，為基于iPS進(jìn)行基因修飾豬的制作打通了技術(shù)路線(xiàn)，為第1篇代表性論文的第一作者。在第2、3、5項科學(xué)發(fā)現中參與克隆豬的制作，為第2、3、5篇代表性論文的作者。 

　　楊化強，第三完成人，職稱(chēng)：副研究員，工作單位：中國科學(xué)院廣州生物醫藥與健康研究院，完成單位：中國科學(xué)院廣州生物醫藥與健康研究院，主要貢獻：第2項科學(xué)發(fā)現的主要完成人，第2篇代表性論文的第一作者。將ZFN介導的基因打靶技術(shù)應用于豬基因修飾，實(shí)現了高效的基因打靶。 

　　顧為望，第四完成人，職稱(chēng)：教授，工作單位：南方醫科大學(xué)，完成單位：南方醫科大學(xué)，主要貢獻：作為項目合作方，為本項目中科學(xué)發(fā)現3“將2A序列介導的多基因協(xié)同表達技術(shù)應用于豬基因組修飾”和科學(xué)發(fā)現4、5“人類(lèi)亨廷頓疾病模型豬制備”和“OG2轉基因模型制備”部分提供研究用豬，共同完成了四色熒光豬和OG2轉基因模型制備，是代表性論文3的通訊作者，代表性論文4和5的作者。 

　　肖磊，第五完成人，職稱(chēng)：教授，工作單位：浙江大學(xué)，完成單位：浙江大學(xué)，主要貢獻：作為項目合方，為本項目中科學(xué)發(fā)現1“以iPS為供體細胞進(jìn)行核移植獲得iPS克隆豬” 提供iPS細胞系，成功獲得了iPS來(lái)源克隆豬，是代表性論文1的通訊作者。 

　　杜玉濤，第六完成人，職稱(chēng)：副教授，工作單位：深圳華大基因研究院，完成單位：深圳華大基因研究院，主要貢獻：作為項目合方，共同完成了本項目中科學(xué)發(fā)現1“以iPS為供體細胞進(jìn)行核移植獲得iPS克隆豬”IPS克隆豬的制作，是代表性論文1的通訊作者。 

　　黃黎珍：第七完成人，職稱(chēng)：助理研究員，工作單位：華南理工大學(xué)，完成單位：南方醫科大學(xué)，主要貢獻：是科學(xué)發(fā)現5的主要完成人，完成了OG2轉基因模型的制備，是代表性論文5的第一作者。 

　　陳霽君：第八完成人，職稱(chēng)：未取得，工作單位：浙江大學(xué)，完成單位：浙江大學(xué)，主要貢獻：是科學(xué)發(fā)現1中豬IPS細胞系的誘導者，是代表性論文1的第一作者。 

　　商周春：第九完成人，職稱(chēng)：助理研究員，工作單位：深圳華大基因研究院，完成單位：深圳華大基因研究院，主要貢獻：是科學(xué)發(fā)現1中豬IPS克隆豬的制作者，是代表性論文1的第一作者。 

　　楊東山，第十完成人，職稱(chēng)：副研究員，工作單位：中國科學(xué)院廣州生物醫藥與健康研究院，完成單位：中國科學(xué)院廣州生物醫藥與健康研究院，主要貢獻：科學(xué)發(fā)現2“ZFN介導的基因打靶技術(shù)應用于豬基因組修飾研究”和科學(xué)發(fā)現4“人類(lèi)亨廷頓疾病模型豬的制備”主要完成人。是代表性論文2和4的第一作者。 

　　趙本田，第十一完成人，職稱(chēng)：助理研究員，工作單位：中國科學(xué)院廣州生物醫藥與健康研究院，完成單位：中國科學(xué)院廣州生物醫藥與健康研究院，主要貢獻：是項目5項科學(xué)發(fā)現中ZFN打靶豬、2A序列介導的四色熒光豬、ips克隆豬、人類(lèi)亨廷頓疾病模型豬、 OG2轉基因模型豬，所有以上模型豬的核移植胚胎制作者。是5篇代表性論文的作者。 

　　歐陽(yáng)振，第十二完成人，職稱(chēng)：助理研究員，工作單位：中國科學(xué)院廣州生物醫藥與健康研究院，完成單位：中國科學(xué)院廣州生物醫藥與健康研究院，主要貢獻：是項目5項科學(xué)發(fā)現中ZFN打靶豬、2A序列介導的四色熒光豬、ips克隆豬、人類(lèi)亨廷頓疾病模型豬、OG2轉基因模型豬，所有以上模型豬的核移植胚胎制作者。是5篇代表性論文的作者。 

　　劉朝明，第十三完成人，職稱(chēng)：助理研究員，工作單位：中國科學(xué)院廣州生物醫藥與健康研究院，完成單位：中國科學(xué)院廣州生物醫藥與健康研究院，主要貢獻：是項目中科學(xué)發(fā)現1、2、3、4中ZFN打靶豬、2A序列介導的四色熒光豬、iPS克隆豬、人類(lèi)亨廷頓疾病模型豬，所有這些模型豬的胚胎移植者，是代表性論文1、2、3、4的作者。 

　　趙宇，第十四完成人，職稱(chēng)：助理研究員，工作單位：中國科學(xué)院廣州生物醫藥與健康研究院，完成單位：中國科學(xué)院廣州生物醫藥與健康研究院，主要貢獻：是科學(xué)發(fā)現1、2、3中ZFN打靶豬、2A序列介導的四色熒光豬、iPS克隆豬，所有這些模型豬的胚胎移植者， 并負責出生克隆豬的防疫護理，是代表性論文1、2、3的作者。 

　　鄧為，第十五完成人，職稱(chēng)：副研究員，工作單位：中國科學(xué)院廣州生物醫藥與健康研究院，完成單位：中國科學(xué)院廣州生物醫藥與健康研究院，主要貢獻：是科學(xué)發(fā)現3“將2A序列介導的多基因協(xié)同表達技術(shù)應用于豬基因組修飾”研究的主要完成者，是代表性論文3的作者。 

　　項目簡(jiǎn)介：  

　　本項目屬于生命科學(xué)生物學(xué)中的動(dòng)物模型研究領(lǐng)域，為基礎研究項目。自2007年起，本團隊聚焦大動(dòng)物基因修飾技術(shù)研究及基因修飾動(dòng)物模型的建立工作。在國際上取得了多項技術(shù)突破，并在此基礎上獲得了亨廷頓疾病模型豬和OG2轉基因模型。 

　　項目主要內容如下： 

　　1、首次獲得了iPS 克隆豬，證明了豬iPS通過(guò)核移植途徑獲得后代個(gè)體的可行性，為基于iPS 進(jìn)行基因修飾大動(dòng)物的制作打通了技術(shù)路線(xiàn)。 

　　2、首次將鋅指核酸酶(zinc finger nuclease, ZFN)介導的基因打靶技術(shù)應用于豬基因修飾，使豬體細胞打靶效率由10-6 提高到4%，并成功獲得了內源性基因打靶豬，實(shí)現了對大動(dòng)物高效基因打靶。 

　　3、首次將2A序列介導的多基因轉移技術(shù)應用于豬基因組修飾，成功獲得了四色熒光豬，并實(shí)現了多個(gè)外源基因在動(dòng)物體內的高效協(xié)同表達。 

　　4、成功獲得了人類(lèi)亨廷頓舞蹈癥的轉基因豬模型，并首次在亨廷頓舞蹈癥的動(dòng)物模型大腦中發(fā)現與人類(lèi)亨廷頓舞蹈癥患者腦中類(lèi)似的神經(jīng)細胞凋亡現象。 

　　5、獲得了OG2轉基因豬模型，為研究胚胎發(fā)育和追蹤干細胞的多潛能性提供了帶有標記的工具豬模型。

　　以上工作緊密?chē)@大動(dòng)物基因修飾技術(shù)進(jìn)行研究，解決了缺乏ES 系大動(dòng)物基因修飾研究中的兩大技術(shù)難題-基因打靶效率低和多基因協(xié)同表達困難，同時(shí)，iPS克隆豬的獲得為以iPS替代ES進(jìn)行基因修飾豬制作打通了技術(shù)路線(xiàn)，并在技術(shù)突破的基礎上成功獲得人類(lèi)亨廷頓舞蹈癥模型豬和OG2轉基因模型。 

　　本項目在Cell Research、Human Molecular Genetics等雜志上發(fā)表論文5篇，其中發(fā)表在Human Molecular Genetics的論文被選為封面文章刊出。論文被SCI數據庫論文總引用149次，他引115次，單篇最高引用49次，他引42次。項目在大動(dòng)物基因修飾技術(shù)方面所取得的突破及所獲得的動(dòng)物模型將進(jìn)一步促進(jìn)基因修飾大動(dòng)物作為生物醫藥模型的研究，推動(dòng)生物醫藥業(yè)的發(fā)展，具有巨大的社會(huì )效益和經(jīng)濟效益。 

　　代表性論文目錄： 

　　1. Piglets cloned from induced pluripotent stem cells. Fan N, Chen J, Shang Z, Dou H, Ji G, Zou Q, Wu L,He L, Wang F, Liu K, Liu N, Han J, Zhou Q, Pan D, Yang D, Zhao B, Ouyang Z, Liu Z, Zhao Y, Lin L,Zhong C, Wang Q, Wang S, Xu Y, Luan J, Liang Y, Yang Z, Li J, Lu C, Vajta G, Li Z, Ouyang H, Wang H,Wang Y, Yang Y, Liu Z, Wei H, Luan Z, Esteban MA, Deng H, Yang H, Pei D, Li N, Pei G, Liu L, Du Y,Xiao L, Lai L. Cell Res. 2013 Jan;23(1):162-6.  

　　2. Generation of PPARγ mono-allelic knockout pigs via zinc-finger nucleases and nuclear transfer 

　　cloning.Yang D, Yang H, Li W, Zhao B, Ouyang Z, Liu Z, Zhao Y, Fan N, Song J, Tian J, Li F, Zhang J,Chang L, Pei D, Chen YE, Lai L.Cell Res. 2011 Jun;21(6):979-82.  

　　3. Use of the 2A peptide for generation of multi-transgenic pigs through a single round of nuclear transfer.Deng W, Yang D, Zhao B, Ouyang Z, Song J, Fan N, Liu Z, Zhao Y, Wu Q, Nashun B, Tang J, Wu Z, GuW, Lai L.PLoS One. 2011;6(5):e19986. 

　　4. Expression of Huntington's disease protein results in apoptotic neurons in the brains of cloned transgenicpigs.Yang D, Wang CE, Zhao B, Li W, Ouyang Z, Liu Z, Yang H, Fan P, O'Neill A, Gu W, Yi H, Li S, LaiL, Li XJ.Hum Mol Genet. 2010 Oct 15;19(20):3983-94.  

　　5. Establishment of a porcine Oct-4 promoter-driven EGFP reporter system for monitoring pluripotency ofporcine stem cells.Huang L, Fan N, Cai J, Yang D, Zhao B, Ouyang Z, Gu W, Lai L.Cell Reprogram. 2011Apr;13(2):93-8.