發(fā)布時(shí)間:2017-03-28來(lái)源:來(lái)源:中國科學(xué)報
本報訊(記者朱漢斌 通訊員黃博純)近日,中國科學(xué)院廣州生物醫藥與健康研究院呼吸疾病國家重點(diǎn)實(shí)驗室結核病研究室張天宇課題組發(fā)明了新的可高效構建無(wú)抗性標記的分枝桿菌的抗性表達盒。相關(guān)研究3月24日在線(xiàn)發(fā)表于《前沿微生物學(xué)》上。
該課題組首次發(fā)現硫鏈絲菌素抗性基因(tsr)可用作結核菌、卡介苗等的抗性篩選基因。硫鏈絲菌素相對便宜、用量少,產(chǎn)生自發(fā)耐硫鏈絲菌素的結核菌的突變率極低。同時(shí)它不用于治療結核,不用擔心產(chǎn)生耐藥的結核菌,且tsr用于對臨床菌進(jìn)行遺傳操作較為理想。慶大霉素抗性基因(aacC1)可以用做恥垢分枝桿菌和大腸桿菌的抗性篩選基因。
該課題組把這兩個(gè)基因優(yōu)化加上合適的啟動(dòng)子,同時(shí)在兩側加上可以被分枝桿菌Xer系統識別的可自動(dòng)解離的dif序列。這樣就構成了dif-hsp60-aacC1-tsr-dif抗性表達盒。它可以用來(lái)高效構建大腸桿菌—分枝桿菌穿梭質(zhì)粒,進(jìn)而可以高效構建無(wú)抗性篩選標記的重組分枝桿菌,已申報專(zhuān)利。
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